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環(huán)凱生物酶底物法檢測系統(tǒng)(含質(zhì)控樣)-酶底物法檢測水中總大腸菌群、糞(耐熱)大腸菌群、大腸埃希氏菌解決方案!

發(fā)布時間:2023-12-05      瀏覽次數(shù):4519    分享:

環(huán)凱生物酶底物法檢測系統(tǒng)(含質(zhì)控樣)
—GB/T5750-2023《 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法》酶底物法
—HJ1001-2018《 水質(zhì) 總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測定酶底物法》

環(huán)凱生物酶底物法檢測系統(tǒng)(含質(zhì)控樣)

一、相關(guān)產(chǎn)品特點

適用性廣/可靠度高

依據(jù)GB/T5750-2023《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法》和HJ1001-2018《水質(zhì)總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測定酶底物法》中的酶底物法檢測培養(yǎng)基要求,環(huán)凱生物自主研發(fā)了酶底物法專用的MMO-MUG培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基通過了對100株包含大腸菌群、大腸埃希氏菌或糞(耐熱)大腸菌群(包括從水樣分離的菌株和標(biāo)準(zhǔn)菌株)的驗證,結(jié)果顯示其特異性高,陽性菌株特征明顯,無假陰性情況。培養(yǎng)基的靈敏度高,可精確檢出低至1MPN/100 mL水樣中的大腸菌群和大腸埃希氏菌或糞(耐熱)大腸菌群活菌,并且對水樣中常見的非大腸菌群(包括酶底物假陽性菌株)具有明顯的抑制作用。產(chǎn)品已通過超200份樣品的測試,涵蓋生活飲用水、地表水、地下水、生活污水和工業(yè)廢水等多個領(lǐng)域。

為了滿足客戶的方法驗證、培養(yǎng)基適用性驗證、陽性對照和定量檢測等需求,環(huán)凱生物推出了可追溯的質(zhì)控樣。產(chǎn)品結(jié)果顯示底物或熒光底物特異性高,通過抑菌劑有效抑制其他異養(yǎng)菌,能夠準(zhǔn)確檢測出水樣中的大腸菌群和大腸埃希氏菌或糞(耐熱)大腸菌群活菌。通過顏色或熒光判讀結(jié)果,陰陽性區(qū)分明顯。

操作簡單/檢驗周期短

只需4步即可完成檢測,平均每分鐘可檢測一份樣品。
檢驗周期只需24小時,無需驗證試驗。

環(huán)凱生物酶底物法檢測系統(tǒng)特點

二、產(chǎn)品檢測原理

總大腸菌群、糞大腸菌群、大腸埃希氏菌能產(chǎn)生B-半乳糖苷酶,使培養(yǎng)基中的無色底物鄰硝基苯β-D-吡喃半乳甘糖分解黃色的鄰硝基苯酚,其中大腸埃希氏菌還能同時產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸酶,使培養(yǎng)基中的4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸酶分解為-甲基傘形酮,在紫外燈照射下產(chǎn)生熒光。在36±1℃經(jīng)培養(yǎng)后培養(yǎng)孔變黃的為總大腸菌群;培養(yǎng)孔變黃并伴有熒光的為大腸埃希氏菌;44.5C培養(yǎng)后培養(yǎng)孔變黃的為糞大腸菌群,變黃并有熒光的為大腸埃希氏菌。統(tǒng)計陽性反應(yīng)出現(xiàn)的數(shù)量,對照MPN圖表,分別計算出總大腸菌群,糞大腸菌群,大腸埃希氏菌的濃度值。

酶底物法檢測系統(tǒng)(含質(zhì)控樣)技術(shù)參數(shù)
—— 水中大腸菌群檢測酶底物法產(chǎn)品系列(含質(zhì)控包)技術(shù)參數(shù)

酶底物法檢測系統(tǒng)(含質(zhì)控樣)技術(shù)參數(shù)

飲用水、地表水、污水檢測
—— 適用于自來水系統(tǒng)、疾病預(yù)防控制中心、進(jìn)出口檢驗檢疫系統(tǒng)、第三方檢測實驗室、環(huán)境監(jiān)測站、污水處理廠、水文站等系統(tǒng)
符合GB/T5750-2023《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法》酶底物法(MMO-MUG)和HJ1001-2018水質(zhì)總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測定酶底物法》培養(yǎng)基要求

一、定量操作

定量操作

1、無顏色變化:陰性
2、如果是36±1℃培養(yǎng)24小時:黃色孔格數(shù)對照MPN表得到總大腸菌群檢測結(jié)果;黃色且熒光的孔格數(shù)對照MPN表得到大腸埃希氏菌檢測結(jié)果
3、如果是44.5°C培養(yǎng)24小時:黃色孔格數(shù)對照MPN表得到耐熱大腸菌群檢測結(jié)果

二、定性操作

將100mL水樣加入100mL無菌取樣瓶中,向瓶中加入環(huán)凱的MMO-MUG培養(yǎng)基,輕搖瓶子確保培養(yǎng)基完全溶解后,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h。

定性操作

1、無顏色變化:陰性
2、顏色變黃:總大腸菌群陽性
3、顏色變黃且觀察到熒光(使用366nm紫外燈照射顯黃色的取樣瓶,呈現(xiàn)明顯熒光):大腸埃希氏菌陽性

三、10管法操作

《GB5750.12-2023》酶底物法中對10管法的操作描述如下:
將100mL水樣加入100mL無菌取樣瓶中,向瓶中加入環(huán)凱的MMO-MUG培養(yǎng)基,輕搖瓶子確保培養(yǎng)基完全溶解;
準(zhǔn)備10支無菌試管,用無菌吸管從上述水樣瓶中分別吸取10mL水樣至各試管中,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。

10管法操作

1、如果是36±1℃培養(yǎng)24小時:黃色管數(shù)對照MPN表得到總大腸菌群檢測結(jié)果;結(jié)果讀?。狐S色且熒光的管數(shù)對照MPN表得到大腸埃希氏菌檢測結(jié)果;
2、如果是44.5℃培養(yǎng)24小時:黃色管數(shù)對照MPN表得到耐熱大腸菌群檢測結(jié)果。請查閱GB5750.12-2023酶底物法10管法MPN表獲取檢測結(jié)果。

質(zhì)量控制體系(質(zhì)控樣)
—— 請在專業(yè)技術(shù)人員指導(dǎo)下完成

意義:
● 符合GB27043-2012合格評定能力驗證的通用要求,符合CNAS-CL01-A001-2022對微生物實驗室的要求;
● 用于識別培養(yǎng)基、設(shè)備、方法是否準(zhǔn)確及評估操作人員的能力和確認(rèn)其資格;
● 檢測測量方法的有效性。

操作步驟
01、準(zhǔn)備1個空的無菌瓶(>300 mL) 和300mL 稀釋液(無菌水或無菌PBS 緩沖液)。
02、將質(zhì)控樣凍干粉從冰箱中取出,置于室溫10~15分鐘平衡溫度。
03、打開質(zhì)控凍干粉,加入稀釋液3mL溶解凍干粉,待充分溶解后全部轉(zhuǎn)移到無菌瓶中。
04、加少量的稀釋液沖洗凍干粉瓶,回收所有質(zhì)控樣菌懸液到無菌瓶中,將剩余的稀釋液倒入,充分振蕩確保均勻,總體積為300mL。
05、每個質(zhì)控樣凍干粉的量可做3個平行實驗,將質(zhì)控樣懸液倒入取樣瓶,每瓶定容到100mL 刻度。
06、將MMO-MUG  培養(yǎng)基倒入每個含質(zhì)控樣取樣瓶中,混勻。將所有混合液倒入97孔定量盤中并封膜,在36±1°C培養(yǎng)24小時。 
07、判讀:黃色孔格為總大腸菌群陽性,黃色且顯熒光為大腸埃希氏菌陽性,對照MPN表定量計數(shù)。

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